產品簡介

核糖核酸酶（RNases）是普遍存在于環境和許多生物材料中的一類酶。它們可以降解RNA，對許多涉及RNA的研究和生產過程造成影響。

RNase檢測試劑盒基于熒光基團標記的RNA探針，當樣本中不含RNase活性時，該探針穩定存在，不會產生熒光信號；當樣本中含有RNase活性時，探針被降解，產生逐漸增強的熒光信號；熒光信號增加的速率與酶的數量和活性成正相關。用熒光酶標儀在ex/em=535/575nm波長下測定熒光信號增加倍數，判斷樣本是否被RNase污染。

儲存運輸條件及有效期

1）-25~-15℃運輸；

2）試劑盒不同組分按如下溫度分別儲存：

名稱                                                 儲存溫度

10×反應液                                       -25~-15℃

RNA探針                                         -25~-15℃

TE緩沖液                                        -25~-15℃

RNase A標準品 (10mg/mL)           -25~-15℃

標準品稀釋液                                 -25~-15℃

無RNase水                                     -25~30℃  

RNase清除劑                                  2~30℃       

3）未開封試劑盒儲存 12個月；開封后試劑盒儲存6個月，RNA探針溶液建議根據單次使用量進行分裝，避光儲存，避免反復凍融。

產品特點

靈敏度高：檢出限低至RNase A：0.313pg/mL，約1.56×10-9 U/μL，僅為進口同種試劑盒的1/8。

精密度高：批內CV≤10%，批間CV≤15% 。

穩定性好：低溫避光，可長期穩定儲存。

Q1：RNase檢測試劑盒的反應溫度和時間是怎樣的？

請將反應體系置于37℃恒溫條件下進行實驗，反應時間為30分鐘。

Q2：什么情況下可能出現假陽性或假陰性結果或定量結果不準確？

a.存在可能干擾熒光基團發光的物質，可能導致假陰性結果；

b.如果待測樣本溶液中含有抑制RNA酶活性的物質，可能導致假陰性結果；

c.引起RNA探針化學性質不穩定性的溶液，可能導致假陽性或假陰性結果。

Q3：制備標準品溶液時，前面的步驟為什么要用標準品稀釋液稀釋而不是用無RNase水稀釋？

因為標準品在標準品稀釋液中比較穩定，即使多次稀釋也不會改變它本身的活性。如果用水稀釋，多步操作可能會造成標準品的活性改變，標準曲線產生偏差。

Q4：如何調節合適的酶標儀增益值？

如您的酶標儀有自動增益選項，則選用自動增益。如您的酶標儀沒有自動增益選項，則根據增益值范圍先設置中間值，然后根據反應后陽性對照孔（79μL無RNase水+1μL RNase A標準品）的熒光值來調節合適的增益值：如超過儀器上限，則適當降低增益值，如遠低于儀器上限，則適當調高增益值。

Q5：為什么嚴重污染的樣本可能會出現假陰性的結果？

判定RNase污染的標準是：RFU30(待測樣本)≥2×RFU0（待測樣本），即反應30分鐘時的RFU值達到0分鐘的RFU值的2倍以上。如果樣本被嚴重污染，則有可能反應開始時速度很快，在非常短的時間測到一個很高的RFU0值，出現RFU30（待測樣本）＜2×RFU0（待測樣本）的假陰性結果。此時需要用無RNase水來稀釋待測樣本。

Q6：陰性對照RFU值不為0，就說明陰性對照被污染了嗎？

不一定。陰性對照通常也能夠測到較低的RFU值，但不會隨著反應時間的延長而RFU值顯著增加，一般認為30分鐘的RFU30小于0分鐘的RFU0的2倍就說明陰性對照沒有被污染。